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如何知道对照品的浓度，在不同的测定方法中

文章出处：小蔡人气：发表时间：2018-07-31 16:00

【用户疑问】如何知道对照品的浓度，在不同的测定方法中

【小编解答】其实要知道对照品的浓度，需要先确定你是用什么测定方法来测定的，不同的方法，求浓度当然也有不同的办法，就比如测定方法分为：用HPLC测定、高效液相测定、紫外-可见分光光度法以及微生物检定法等这些测定方法求浓度都有不同的方式。

一、hplc测定求对照品浓度

普通的有关物质对照溶液的浓度根据样品的***低检出限来定。它们之间的关系爲检出限浓度的100倍爲对照溶液的浓度，对照溶液浓度的100倍爲样品溶液的浓度。但在理论操作中应该根据详细的液相条件来一定，参照基线乐音，峰行等要素一定，普通对照溶液浓度比检出限浓度都大于100倍。还有一个说法是将样品溶液的浓度定到作出的峰是平头的，再定对照溶液浓度，但小编团体任务不太可行，那样浓度太大了。

二、高效液相测定求对照品浓度
高效液相中同一种物质的峰面积和浓度呈正比。所以说浓度的公式为：供试品浓度=（样品峰面积*对照品浓度）/对照品峰面积，非常简单。

三、紫外-可见分光光度法求对照品浓度

根据 Lambert-Beer 定律 A = epsilon (入) × c × l ，这里的 A 是溶液的吸光度,是一个无量纲的值；epsilon (入) 是对应的吸收波长下物质的摩尔消光数值,单位是 L / (mol cm) 是溶液的摩尔浓度,单位是 mol/L ；l 是吸收光程,单位是 cm.

一般由紫外-可见吸收光谱测得 A,由于是在 1 cm 的比色皿中测量的,所以光程为 1 cm,要求溶液的浓度,需要查该物质在对应波长下的“摩尔消光系数”,然后代入 A = epsilon (入) × c × l ,那么我们整理后得：c = A / [ epsilon (入) × l ]，即可求出溶液的浓度。

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